基因敲入
基因敲入(Knock-in)模型的应用:
模拟人类遗传机制,探索致病机制
示踪基因表达
进行谱系示踪,追溯细胞起源
将小鼠基因人源化,加速药物研发
将分子遗传学工具引入小鼠模型中
基因敲入模型包括:
通过CRISPR基因编辑技术,构建一个基因敲入小鼠模型一般需要6-9个月。
通过ES细胞打靶技术,构建一个基因敲入小鼠模型一般需要9-12个月。
您可以联系我们的技术顾问,为您设计并定制您的基因敲入小鼠模型。
南模生物拥有逾6000种基因修饰小鼠模型,也许您感兴趣的品系就在其中,点击查看。
常规基因敲入
外源基因共表达策略:
外源基因替代小鼠內源基因表达策略(即敲入同时敲除):
点突变
将点突变(人类致病候选点突变)引入到小鼠同源基因对应位置。
条件性点突变
将点突变(人类致病候选点突变)与Cre-LoxP系统结合,引入到小鼠同源基因对应位置,可实现组织特异性点突变。
通过插入Loxp位点和含有突变位点的Exon实验基因的条件性点突变。
人源化
将小鼠內源基因替换为人源同源基因,构建用于疾病、免疫、生理学研究以及抗体药物筛选及药效评价的人源化基因工程小鼠模型。
完整替换策略:
直接插入人源cDNA策略:
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Cre-ERT2在无Tamoxifen诱导的情况下,在细胞质内处于无活性状态;当Tamoxifen诱导后,Tamoxifen的代谢产物4-OHT(雌激素类似物)与ERT结合,可使Cre-ERT2进核发挥Cre重组酶活性。
Learn more你一定听说过Cre-lox重组系统,无论你是否直接进行过基因操作。由于Cre-lox系统具有操作简单、重组率高的优点,如今已经成为体内外遗传操作的强有力工具。利用Cre-lox系统,可以在特定细胞、组织或整个生物体,甚至在特定时间点敲除或表达某个基因,实现对特定基因的时空特异性操作,这对基因功能的研究和人类疾病动物模型的建立都具有深刻影响。
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